研生試劑-戊型肝炎實(shí)驗(yàn)室診斷與結(jié)果分析
戊型肝炎(viralhepatitisE，簡(jiǎn)稱戊型肝炎或戊肝)是一種由戊型肝炎病毒(hepatitisEvirus，HEV)引起的自限性傳染病，其傳播方式、臨床表現(xiàn)和預(yù)后均與甲型肝炎(甲肝)類似，但黃疽型較常見，主要累及青壯年，一般呈良性經(jīng)過。但是孕婦感染者病情較重，病死率可高達(dá)25％。
[病因?qū)W] 1983年，Balayan等人首先用免疫電子顯微鏡從感染者的糞便標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)了HEV。1989年，Reyes等人采用分子克隆技術(shù)獲得了HEV cDNA克隆，并正式命名本病毒為HEV。HEV是大小為27～37nm的單股正鏈無包膜的RNA病毒，其表面有許多微小的凸起結(jié)構(gòu)，與HAV的平滑表面明顯不同。在氯化銫中的浮密度為1．35-1．40g／cm3，沉降系數(shù)為183s。HEV儲(chǔ)存于-70～8℃環(huán)境中不穩(wěn)定，液氮中則極為穩(wěn)定。在酸性和弱堿性環(huán)境中較穩(wěn)定，可存在于肝內(nèi)膽汁和膽囊膽汁中。研究表明，HEV的基因組長(zhǎng)約7．5kb，編碼2 400—2 533個(gè)氨基酸，由5’端非結(jié)構(gòu)區(qū)和3’端結(jié)構(gòu)區(qū)組成，5’端和3’端各有一非編碼區(qū)，其長(zhǎng)分別為28bp和68bp。不同HEV分離株間有血清交叉反應(yīng)，也有交叉保護(hù)作用。對(duì)易感動(dòng)物接種某地區(qū)分離株，兩年后再用另一分離株感染，可獲得交叉保護(hù)，出現(xiàn)抗—HEV抗體升高，表明存在免疫記憶。因此，推測(cè)HEV有多種分離株，但只有一種血清型。
[實(shí)驗(yàn)室診斷]
1．特異性檢查 免疫學(xué)檢測(cè)指標(biāo)——HEV Ag、抗—HEV IgG、抗—HEV IgM和HEVRNA等。
2．非特異性檢查 肝功能試驗(yàn)。
[結(jié)果分析與判斷] 可用免疫電子顯微鏡或ELISA法檢測(cè)糞便或膽汁中HEVAg，或以免疫熒光法檢測(cè)肝組織內(nèi)HEV Ag。但是由于病毒顆粒較少，存在時(shí)間短，陽性率不高，難以作為戊型肝炎的常規(guī)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法。抗—HEVIgM出現(xiàn)和消失均較早，在黃疸后26d陽性率為73％，1—4個(gè)月為50％，8個(gè)月后全部消失。表明抗—HEVIgM的持續(xù)時(shí)間較短，可作為HEV急性感染的診斷指標(biāo)，但存在一定的假陽性。HEV抗原性較弱，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染HEV后產(chǎn)生的抗體反應(yīng)不及HAV感染時(shí)明顯，患者急性期、恢復(fù)期抗—HEV IgG陽性率低，血清中抗體存在時(shí)間短，這些均給戊型肝炎患者的血清學(xué)診斷帶來了困難。通常認(rèn)為，戊型肝炎患者的IgG抗體陽轉(zhuǎn)時(shí)間早，幾乎與IgM抗體同時(shí)出現(xiàn)，而且與IgM抗體相比，具有檢出率高和抗體滴度高等特點(diǎn)，因此有理由將其作為HEV急性感染的一項(xiàng)輔助指標(biāo)。但由于抗—HEV存在時(shí)間有爭(zhēng)議，故對(duì)其診斷意義有異議。抗—HEV．IgG是否存在保護(hù)性免疫，目前認(rèn)識(shí)尚不一致。可用RT-PCR法檢測(cè)HEVRNA，從而早期診斷HEV感染，并對(duì)抗體檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行確證，判斷患者排毒期限以及分子流行病學(xué)研究。
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