腦粘體蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中給檢測(cè)樣本加樣的步驟詳解：
1.細(xì)胞上清:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100p1即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
2.腦脊液:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100W1即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。
3.血清血漿:加入50u山樣本分析緩沖液后加50u標(biāo)本如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本分析緩神液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100u。
①血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液。
②血漿標(biāo)本,推薦用EDTA的方法收集若待測(cè)樣本不能及時(shí)檢測(cè),標(biāo)本收集后請(qǐng)分裝凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融。
③血清標(biāo)本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑。
④標(biāo)本應(yīng)清澈透明,檢測(cè)前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過(guò)離心去除。
⑤請(qǐng)勿使用溶血,高血脂或污染的標(biāo)本檢測(cè),否則結(jié)果將不準(zhǔn)確。
4.組織勻漿液的樣本:要制備過(guò)程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酧降解,造成檢測(cè)結(jié)果的值偏低。因組織勻漿液的樣本蛋白種類多,含量豐富,驗(yàn)參照血清血漿標(biāo)本的處理方法進(jìn)行,否則就會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。具體是加入50u樣本分析緩沖液后加50u標(biāo)本,需稀釋時(shí),請(qǐng)將樣本與樣本分析緩神液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100ul。
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